文章目录

1 材料与方法

1.1 材料和试剂

1.2 细胞培养

1.3 细胞转染

1.4 细胞增殖实验

1.5 细胞平板克隆形成实验

1.6 细胞迁移、侵袭实验

1.7 细胞总RNA提取和Real-time PCR

1.8 细胞总蛋白提取和Western blot

1.9 转录组测序

1.10 统计学分析

2 结果

2.1 MUC1敲减实验及验证

2.2 MUC1敲减后抑制SACC细胞增殖和克隆形成能力

    2.2.1 细胞增殖能力比较

    2.2.2 细胞克隆形成能力比较

2.3 MUC1敲减后抑制SACC细胞迁移和侵袭

    2.3.1 细胞迁移能力比较

    2.3.2 细胞侵袭能力比较

2.4 转录组测序分析

2.5 MUC1可靶向激活EGFR/ERK磷酸化发挥生物学作用

3 讨论

文章摘要:目的:研究黏蛋白1（MUC1）对唾液腺腺样囊性癌（ACC）细胞生物学功能的影响及其分子机制。方法:首先通过慢病毒（shMUC1）转染对ACC细胞系中MUC1基因进行敲减,通过Real-time PCR和Western blot检测敲减效果;CCK-8实验检测细胞的增殖能力;平板克隆形成实验评价细胞的克隆形成能力;Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;采用转录组测序筛选MUC1调控的相关信号通路,并通过Wesern blot验证分析。结果:转染MUC1慢病毒后,ACC细胞中MUC1 mRNA和蛋白表达量显著降低（P<0.05）;MUC1敲减后ACC细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著下降（P<0.05）;转录组测序分析和Western blot结果表明MUC1主要通过调控EGFR/ERK磷酸化水平影响ACC细胞的生物学功能。结论:MUC1可通过调控EGFR/ERK磷酸化水平促进ACC细胞的增殖、平板克隆、迁移和侵袭,提示MUC1在ACC进展中可能发挥重要作用。

文章关键词:

项目基金: 上一篇：妇产科学论文_妊娠期糖尿病孕妇一日门诊饮食个 下一篇：没有了